A Hot-start Taq enzimet széles körben használják.A hagyományos DNS-polimerázhoz képest a hot-start Taq enzim hatékonyan elkerülheti a nem specifikus amplifikációt és a primer dimerek képződését, és hatékonyan javíthatja a célgén-amplifikáció sikerességét.Különösen a genetikai tesztelés területén a hot-start Taq enzimet az iparban kötelező szabványként azonosították, és a közönséges DNS-polimerázt nem szabad használni.Amint az a fentiekből látható, a hot-start Taq enzimeket széles körben használják.Jelenleg számos hot-start Taq-enzim márka van a hazai piacon, de jó minőségű hot-start Taq enzim nem sok.Hogyan válasszunk oly sok gyorsindítású Taq enzimtermékkel?

1. Válassza ki a magas amplifikációs hatékonyságú hot-start Taq enzimet

A PCR amplifikáció hatékonysága szorosan összefügg a Taq enzim teljesítményével.Egy jó Taq enzimreakciórendszer optimalizálása után az amplifikációs hatékonyság 95% feletti, és a kezdeti templát mennyiségének amplifikációs tartománya széles.Kielégítő amplifikáció érhető el, ha a célgén tartalom alacsony, és nem könnyű mérgezni, ha magas a templát mennyiség, és az exponenciális amplifikációs periódus hosszú.A gyenge teljesítményű Taq enzim esetében, még ha a reakciórendszert sokszor optimalizálták is, az amplifikációs hatékonyság még mindig 90% alatti, az amplifikációs görbe „S” alakja nem szembetűnő, a meredekség kicsi, a görbe lapos.Ha a templát mennyisége alacsony, akkor nem erősíthető, és ha a templát mennyisége magas, az erősítési hatás nem ideális.Ezért a nagy amplifikációs hatékonyságú DNS-polimerázok kiválasztása kulcsfontosságú a PCR és qPCR sikeréhez.

2. Válassza ki az erős enzimerősségű hot-start Taq enzimet

A Taq enzim enzimatikus ereje összefügg az amplifikációs hatékonysággal.Általánosságban elmondható, hogy minél erősebb a hot-start Taq enzim enzimatikus ereje, annál hosszabb a PCR amplifikáció exponenciális növekedési periódusa, minél jellemzőbb az „S-alakú” görbe, annál magasabb a fluoreszcencia jel értéke, és annál alkalmasabb a multiplex PCR detektálásra.A gyenge enzimerővel rendelkező márka DNS polimerázok általában csak 2-plex reakciókat képesek támogatni.3-plex reakciók végzése során az amplifikációs görbe alacsony, a fluoreszcencia jel értéke alacsony, és nincs tipikus amplifikációs görbe, így az eredményeket nehéz megítélni.

3. Válasszon ki egy nagy érzékenységű hot-start Taq enzimet

Általánosságban elmondható, hogy a DNS-polimeráz nagy amplifikációs hatékonysággal és nagy érzékenységgel rendelkezik, de vannak ellentmondások is.Ha az amplifikálandó minta célgén-bősége alacsony, javasolt a Taq enzim amplifikációs érzékenységének vizsgálata.A legelterjedtebb kimutatási módszer a célgén plazmidfragmens 10-szeres vagy 5-szörös gradiens hígítása, alacsonyabb hígítású PCR-detektálás, és a magasabb detektálási érzékenységű hot-start Taq enzim kiválasztása.

A fentiekből látható, hogy a kutatóknak saját kísérleti követelményeik és finanszírozási feltételeik szerint kell választaniuk.A legjobb egy gradiens hígítású amplifikációs kísérletet végezni a hot-start Taq enzim amplifikációs hatékonyságának és érzékenységének kimutatására.

Egy példa a Foregene-re's Taq DNS polimeráz:

Foreasy HS Taq DNS polimeráz

Leírás

A Foreasy HS Taq DNS-polimeráz egy DNS-polimeráz, amely Escherichia coli-ban génrekombinációs technológiával mérnöki baktériumokban expresszálódik.Az enzimet egyedi reakciópufferrel kombinálják, amely rendkívül ellenállóvá és kompatibilissá teszi a terméket, és közvetlenül felhasználhatja a minta lizátumát (Foregene Lysis rendszer) templátként a detektálási reakciókhoz.

Alkalmazás

Tisztított és nem tisztított templátok kvalitatív PCR és kvantitatív PCR kimutatása.

Minőség ellenőrzés

1.Nem észleltünk exogén nukleáz aktivitást

2. PCR módszer a maradék genomiális DNS kimutatására gazdaszervezet nélkül

3. Hatékonyan képes amplifikálni az egykópiás géneket az emberi genomban

4. Tárolja szobahőmérsékleten egy hétig, az aktivitás változása nélkül

Termék részletek: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/