Bevezetés:

Az RNS-molekulák kiterjedt kölcsönhatásba léphetnek más biológiai molekulákkal, például fehérjével, DNS-sel és RNS-sel, és így a sejtekben és szervezetekben makromolekuláris komplexek formájában léteznek.Közülük az RNS-fehérje komplexek az RNS léte és működése Az egyik fontos formája.Az RNS lehúzás egy klasszikus módszer az RNS-molekulák, különösen az lncRNS-molekulák kölcsönhatásba lépő fehérjéinek szűrésére és azonosítására, és a legtöbb kutató és tekintélyes nemzetközi tudományos folyóirat elismeri.Ma a FORREGENE megosztja veled az RNS lehúzásának kísérleti elvét és technikai folyamatát, talán használhatod

1. Az RNS lehúzási technológia kísérleti elve:

Biotinnal jelölt cél-lncRNS vagy lncRNS-fragmensek (beleértve a pozitív és negatív kontrollként használt RNS-fragmenseket) in vitro transzkripciója és szintézise, ​​valamint sejtkivonatokkal való inkubálása;RNS-fehérje vagy RNS-RNS komplexek összegyűjtésére használjon avidinhez rögzített mágneses gyöngyöket. Alapos mosás után a komplex eluálódik.Ha észleli az lncRNS-sel kölcsönhatásba lépő fehérje célmolekulát, végezzen fehérjeelektroforézist az RNS-lehúzó terméken, detektálja a célfehérjét ezüstfestéssel, és vágja le a gélt tömegspektrometriához;közvetlenül is végezzen Western blot ellenőrzést a legördülő terméken;ha kimutatható Az lncRNS-sel kölcsönhatásba lépő RNS-célmolekulák esetében az RNS-lehúzó termékeket RNS-kivonásnak vetik alá, és specifikus qRT-PCR kimutatást végeznek.

2. RNA pull down technológia kísérleti folyamat:

3. A FOREGENE RNS leállításának műszaki szolgálata:

Sejttenyésztés

Sejt teljes/nukleáris/plazmafehérje kivonat készítése

RNS lehúzási kísérlet

SDS-PAGE elektroforézis, ezüstfestés

Tömegspektrometria és WB kísérletek

Kísérleti jelentés

4. Kísérleti eset

Az alábbi ábra az FJ Bio-Bio RNS lehúzásának és az SDS-PAGE elektroforézis detektálásának eredményeit mutatja, amelyben a piros nyíl jelzi a különbségi sávot:

Song Xu professzor, a Szecsuáni Egyetem kutatócsoportja 15 évnyi hosszú távú felhalmozást gyűjtött össze az lncRNS-kutatás területén.A Foregene Bio és Song Xu professzor kutatócsoportja együttműködött az lncRNS RNS lehúzási technológiájának elindításában, amely kielégítő eredményt ad a kísérlethez.