A PCR-módszerek és a nukleinsav-aeroszolos szennyeződés a nukleinsav-tesztelő laboratóriumokban olyan, mint az érem két oldala.Csak azt választhatjuk, hogy megkapjuk-e vagy sem, de nem választhatjuk, hogy akarjuk-e, vagy elköltjük.

1. DNS-eltávolító szűrése

A nukleinsav-aeroszolos szennyeződés térbeli eltávolításának eléréséhez először is ki kell szűrni azokat a DNS-eltávolítókat, amelyek folyékony állapotban képesek eltávolítani a nukleinsavakat.Mert nincs sok DNS-eltávolító, ami valóban működik.A kísérleti módszerhez kérjük, olvassa el: A DNS-eltávolító nem lehet a laboratórium "titkos sarka"!

Ebben a kísérletben 100 kópia/μL (CT körülbelül 31) digitális PCR-rel kvantifikált ASFV plazmidot és DNS-eltávolítót kevertünk össze egyenlő térfogatban, majd szobahőmérsékleten 10 percig, 20 percig és 30 percig reagáltattuk.Nukleinsav extrakció után qPCR amplifikációt végeztünk.Egy plazmiddal és vízzel kevert pozitív kontrollt hasonlítottunk össze.Mivel a kísérlet nem egy időben fejeződött be, előfordulhat bizonyos eltérés az eredmények között, de ez nem befolyásolja a kísérlet lezárását.Eddig 10 kereskedelmi forgalomban lévő DNS-eltávolító terméket értékeltem.Csak az 1., 6. és 8. számú termékek képesek hatékonyan lebontani a plazmid DNS-t folyékony állapotban.Más termékeknek szinte nincs hatása.

1. táblázat A kereskedelemben kapható DNS-eltávolító nukleinsav-eltávolító hatása

2. Általánosan használt fertőtlenítőszerek DNS-eltávolító hatásának kísérlete

1. Általánosan használt fertőtlenítőszerek átvilágítása

A laboratóriumokban általában sokféle fertőtlenítőszert használnak: aldehidek, fenolok, alkoholok, kvaterner ammóniumsók, peroxidok, klórkészítmények, valamint savak és bázisok.Ezen fertőtlenítőszerek mikroorganizmusokra kifejtett fertőtlenítő hatását kísérletek teljes mértékben igazolták, de a nukleinsavak lebontó hatásáról nincs elegendő kísérleti adat.A nukleinsav-tesztelő laboratóriumoknak olyan fertőtlenítőszerre van szükségük, amely nemcsak a mikroorganizmusokat jó fertőtlenítő hatással bír, hanem a DNS-t is le tudja bontani.A vizsgálati eredmények azt mutatják, hogy csak két klórkészítmény, 84 fertőtlenítő és triklórizocianursav, valamint 1 M sósav felel meg a követelményeknek.Mivel az 1 M sósav erősen maró hatású, ajánlatos a klórkészítményeket hulladékártalmatlanításként használni a nukleinsav-tesztelő laboratóriumokban.A klórkészítmények azonban maró hatásúak a fémekre, és nem használhatók műszerek és berendezések fertőtlenítésére.

2. táblázat Különböző típusú fertőtlenítőszerek DNS-eltávolító hatásai

2. A klórkészítmények minimális hatásos koncentrációja

A klór alapú fertőtlenítőszerek erős DNS-lebontó hatásúak, de fémkorróziós és irritáló hatásuk miatt padló, nem fém munkalapok, áztatócsúcsok, centrifugacsövek és egyéb vizsgálati tárgyak tisztítására használhatók.

Az "Új koszorúér-pneumonia járvány fertőtlenítési műszaki irányelvek" szerint: Szennyező anyagok (a betegek vére, váladéka és hányása) elérhető klór 5g/L-10g/L klórtartalmú fertőtlenítőszer;padlók, falak és tárgyfelületek 1 g/l klóros fertőtlenítőszert használnak: a ruhákat, ágyneműket és egyéb textíliákat először 30 percig áztatják klóros fertőtlenítőszerben 0,5 g/l rendelkezésre álló klórral, majd a szokásos módon tisztítják.

3. táblázat Különböző koncentrációjú klóros fertőtlenítőszerek DNS-eltávolító hatása

A vizsgálati eredmények azt mutatják, hogy: ha az effektív klórkoncentráció nagyobb vagy egyenlő, mint 1,2 g/L, a klórtartalmú fertőtlenítőszer 5 perces használat esetén 100 kópia/μL plazmidot képes teljesen lebontani.Ha 10 percig hat, a 0,6 g/l-nél nagyobb vagy egyenlő effektív klórkoncentrációjú 84 fertőtlenítőszer 100 kópia/μl plazmidot képes teljesen lebontani.

3. Nukleinsav aeroszollal szennyezett levegő eltávolítási kísérlet

Hogyan tisztítsuk meg a nukleinsav-aeroszolokkal szennyezett levegőt?A legtöbb gondolat egy aeroszollal szennyezett környezet létrehozása, majd a tisztítása, vagy a szennyeződés utáni nukleinsavak tisztítása.Számomra értelmetlen az a kísérlet, amely megismételhetetlen és a kísérlet eredményeit nem lehet mennyiségileg elemezni, ezért kölcsönvettem néhány fertőtlenítő légfertőtlenítési módszert.Lásd: "GB27948-2020 Általános követelmények a levegőfertőtlenítő szerekre" és "Fertőtlenítési műszaki előírások"

1. Vizsgálati anyagok

1.1 DNS-eltávolító: Ebben a kísérletben két, kereskedelemben kapható DNS-eltávolítót választottunk ki (6. és 8.) az 1. táblázatban.

1.2 Tesztplazmid: Tekintettel arra, hogy a legtöbb laboratóriumi szennyezés CT értéke 30-nál magasabb lesz, az ASFV génplazmid koncentrációja ezúttal körülbelül 100 kópia/μL, a fluoreszcens kvantitatív PCR CT pedig körülbelül 31,07.Adja hozzá a plazmidot a pelyhesítő pamut törlőhöz, és szárítsa meg levegőn.

1.3 Tesztműszer: A Bilingkehan KVBOX fertőtlenítő eszköz, amelyet a Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd. támogat, kiváló levegőfertőtlenítő teljesítményt nyújt hidrogén-peroxid fertőtlenítőszerrel, és hatékonyan elpusztítja a spórákat és más mikroorganizmusokat.

1.4 Teszttér: zárt, körülbelül 0,1 köbméteres átadó ablak.

2. Vizsgálati módszer

A fertőtlenítő gépre beállított fertőtlenítőszer mennyisége 10 ml, koncentrációja 100 ml/m3, ami jóval magasabb, mint a "GB27948-2020 Általános követelmények a levegőfertőtlenítő szerekre" értéknél: aeroszolos spray fertőtlenítés alkalmazásakor a fertőtlenítőszer mennyisége ≤10 ml/m3 legyen.