Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (mintavevő eszközök nélkül) Protokoll
A készlet leírása:
Közvetlenül használja az állati szöveti lizátumot templátként a PCR-amplifikációhoz, a DNS külön extrakciója nélkül, gyors és nagy érzékenység.Hozzáadott UNG szennyezésgátló rendszer a hamis pozitívumok kiküszöbölésére.
◮Nincs szükség időigényes és költséges DNS-tisztításra.
◮A mintaigény kicsi, csak egyetlen magot vegyünk.
◮Nincs szükség különleges kezelésekre, például őrlésre és aprításra, és a művelet egyszerű.
◮Az optimalizált PCR rendszer lehetővé teszi, hogy a PCR nagyobb specificitást és erősebb toleranciát biztosítson a PCR reakció inhibitoraival szemben.
Leírások
Ez a készlet egyedülálló lízispufferrendszert használ az állati szövetminták genomi DNS-ének gyors felszabadítására PCR-reakciókhoz, így különösen alkalmas nagy léptékű genetikai tesztelésre.
A genomi DNS-nek a lízispufferből való felszabadításának folyamata 65 °C-on 10-30 percen belül befejeződik.Nincs szükség más folyamatokra, például fehérje- és RNS-eltávolításra, és a felszabaduló nyom-DNS felhasználható templátként a PCR-reakcióhoz.
2×PCR EasyTMA Mix (UNG) dUTP-t használ dTTP helyett 2×PCR Easy alapjánTMKeverjük össze és adjuk hozzá az UNG enzimet (Uracil-N-glikoziláz), amely egyidejűleg képes lebontani a dUTP-t tartalmazó templátot.A PCR reakció előtt az UNG enzimet használják az uracilt tartalmazó PCR termék lebontására.Az UNG enzim semmilyen hatással nem lesz az uracilt nem tartalmazó templátra, ezáltal biztosítja az amplifikáció specifitását és pontosságát, valamint megakadályozza a PCR-termékek szennyeződésének lehetőségét a nagyszabású genetikai vizsgálatok során.
A D-Taq DNS polimeráz egy olyan DNS polimeráz, amelyet kifejezetten a Foregene fejlesztett ki közvetlen PCR-reakciókhoz.A D-Taq DNS-polimeráz erősen tolerál számos PCR-reakció-inhibitort, és hatékonyan képes nyomnyi mennyiségű DNS-t amplifikálni különböző komplex reakciórendszerekben, az amplifikációs sebesség pedig elérheti a 2Kb/perc-et, ami különösen alkalmas közvetlen PCR reakcióra.
Kit összetevők
| I. rész | Puffer AL |
| Foregene Protease | |
| 6× DNS-betöltő puffer | |
| rész II | 2×PCR EasyTMMix (UNG) |
Jellemzők és előnyök
■Nincs időigényes és drága DNS-tisztítás
■ A mintaigény kicsi, mindössze 5 mg állati szövet vizsgálható.
■ Nincs szükség különleges kezelésre, például őrlésre és aprításra, és a művelet egyszerű.
■ Az optimalizált PCR-rendszer a PCR-t nagyobb specificitással és erősebb toleranciával rendelkezik a PCR-reakció-inhibitorokkal szemben.
■ Szennyezésgátló PCR rendszer 2×PCR egyszerűTMA Mix (UNG) hatékonyan szünteti meg a PCR-termékek által okozott szennyezést, és biztosítja az amplifikáció specifikusságát és pontosságát.
A készlet paraméterei
Alkalmazás: különféle állati szövetek.
A minta líziséből felszabaduló DNS: csak PCR templátként használják.
A készlet a következő célokra használható: transzgenózis azonosítása, állati genotipizálás stb.
Munkafolyamat
Tárolás és eltarthatóság
Ennek a készletnek az I. részét a 2-8℃.
Az AL reagens Buffer 12 hónapig tárolható száraz körülmények között;2-8-ig tárolható℃hosszabb tároláshoz.
A Foregene Protease reagens egyedülálló formulával rendelkezik.Működésének és stabilitásának biztosítása érdekében kérjük, tárolja a 4℃12 hónapig.
6-os reagens×A DNS-betöltő puffer 4 °C-on tárolható℃vagy -20℃hosszú ideje.
Ennek a készletnek a II. részét -20 °C-on kell tárolni℃.
2. reagens×PCR egyszerűTMMix (UNG), ha gyakran használják, akkor 4-en is tárolható℃rövid távú tárolásra (10 napon belül felhasználható).
