Kínai gyártó a 2-szeres koncentrált premixhez tisztítatlan mintához valós idejű kvantitatív PCR közvetlen multiplex szonda Qpcr Mix Plus U
A szervezet továbbra is a „tudományos irányítás, a magas minőség és a hatékonyság elsődlegessége, a vásárlók legfőbb vevője Kínában Gyártó a 2-szeres koncentrált premixhez a tisztítatlan mintához valós idejű kvantitatív PCR közvetlen multiplex szonda Qpcr Mix Plus U” elvét követi. Vállalkozásunk elkötelezte magát, hogy jelentős és biztonságos, csúcsminőségű termékeket kínáljon ügyfeleinek minden vásárlónknak és szolgáltatásunknak agresszív áron.
A szervezet a „tudományos irányítás, a magas minőség és a hatékonyság elsőbbsége, a vásárló a legfőbbChina Taq DNS polimeráz és Qpcr, Cégünk bőséges erővel és stabil és tökéletes értékesítési hálózattal rendelkezik.Szeretnénk, ha a kölcsönös előnyök alapján szilárd üzleti kapcsolatokat létesíthetnénk minden hazai és külföldi ügyféllel.
Valós idejű PCR primer tervezési elvek
Forward Primer és Reverse Primer
A valós idejű PCR-nél a primer tervezése nagyon fontos.A primerek a PCR-amplifikáció specifitásához és hatékonyságához kapcsolódnak, és a következő elvek alapján tervezhetők:
- Alapozó hossza: 18-30 bp.
- GC tartalom: 40-60%.
- Tm érték: Primer tervező szoftver, mint például a Primer 5, meg tudja adni az alapozó Tm értékét.Az upstream és a downstream primerek Tm értékeinek a lehető legközelebb kell lenniük.A Tm számítási képlet is használható: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).A PCR végrehajtásakor általában az 5 °C-os primer Tm értéke alatti hőmérsékletet választjuk annealing hőmérsékletként (az összekeverési hőmérséklet megfelelő emelkedése növelheti a PCR reakció specificitását).
- Primerek és PCR termékek:
- A tervezési primer PCR amplifikációs termék hossza előnyösen 100-150 bp.
- A sablon másodlagos szerkezeti területén a tervezési alapozókat lehetőleg kerülni kell.
- Kerülje el 2 vagy több komplementer bázis képződését az upstream és downstream primerek 3'-végei között.
- A Primer 3′ csatlakozóaljzata nem lehet jelen további 3 egymást követő G-vel vagy C-vel.
- Maguknak a primereknek nem lehet komplementer szerkezetük, különben hajtűszerkezet képződik, ami befolyásolja a PCR-amplifikációt.
- Az ATCG-t a lehető legegyenletesebben kell elosztani a primerszekvenciában, és a 3'-terminális bázist kerülni kell T-ként.
Függelék1:Cell KözvetlenRT-qPCR Kit összetevőt kiegészítő csomag
1. Sejtlízis oldat
Sejtlízis oldat | |||
Kit összetevők (24-lyukú lízis rendszer / lyuk) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Részén | CL puffer | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
RészII | DNS radír | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Kit összetevők (20 μl reakciórendszer) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNáz-mentes ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR keverék | ||
Kit összetevők (20 μl reakciórendszer) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX referenciafesték | 40 μl | 200 μl |
RNáz-mentes ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
A szervezet továbbra is a „tudományos irányítás, a magas minőség és a hatékonyság elsődlegessége, a vásárlók legfőbb vevője Kínában Gyártó a 2-szeres koncentrált premixhez a tisztítatlan mintához valós idejű kvantitatív PCR közvetlen multiplex szonda Qpcr Mix Plus U” elvét követi. Vállalkozásunk elkötelezte magát, hogy jelentős és biztonságos, csúcsminőségű termékeket kínáljon ügyfeleinek minden vásárlónknak és szolgáltatásunknak agresszív áron.
Kínai gyártó a számáraChina Taq DNS polimeráz és Qpcr, Cégünk bőséges erővel és stabil és tökéletes értékesítési hálózattal rendelkezik.Szeretnénk, ha a kölcsönös előnyök alapján szilárd üzleti kapcsolatokat létesíthetnénk minden hazai és külföldi ügyféllel.
Valós idejű PCR primer tervezési elvek
Forward Primer és Reverse Primer
A valós idejű PCR-nél a primer tervezése nagyon fontos.A primerek a PCR-amplifikáció specifitásához és hatékonyságához kapcsolódnak, és a következő elvek alapján tervezhetők:
- Alapozó hossza: 18-30 bp.
- GC tartalom: 40-60%.
- Tm érték: Primer tervező szoftver, mint például a Primer 5, meg tudja adni az alapozó Tm értékét.Az upstream és a downstream primerek Tm értékeinek a lehető legközelebb kell lenniük.A Tm számítási képlet is használható: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).A PCR végrehajtásakor általában az 5 °C-os primer Tm értéke alatti hőmérsékletet választjuk annealing hőmérsékletként (az összekeverési hőmérséklet megfelelő emelkedése növelheti a PCR reakció specificitását).
- Primerek és PCR termékek:
- A tervezési primer PCR amplifikációs termék hossza előnyösen 100-150 bp.
- A sablon másodlagos szerkezeti területén a tervezési alapozókat lehetőleg kerülni kell.
- Kerülje el 2 vagy több komplementer bázis képződését az upstream és downstream primerek 3'-végei között.
- A Primer 3′ csatlakozóaljzata nem lehet jelen további 3 egymást követő G-vel vagy C-vel.
- Maguknak a primereknek nem lehet komplementer szerkezetük, különben hajtűszerkezet képződik, ami befolyásolja a PCR-amplifikációt.
- Az ATCG-t a lehető legegyenletesebben kell elosztani a primerszekvenciában, és a 3'-terminális bázist kerülni kell T-ként.
Függelék1:Cell KözvetlenRT-qPCR Kit összetevőt kiegészítő csomag
1. Sejtlízis oldat
Sejtlízis oldat | |||
Kit összetevők (24-lyukú lízis rendszer / lyuk) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Részén | CL puffer | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
RészII | DNS radír | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Kit összetevők (20 μl reakciórendszer) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNáz-mentes ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR keverék | ||
Kit összetevők (20 μl reakciórendszer) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX referenciafesték | 40 μl | 200 μl |
RNáz-mentes ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Használati útmutatók: