betartja a szerződést”, megfelel a piaci elvárásoknak, jó minőségével kiáll a piaci versenyből, valamint átfogóbb és kiválóbb támogatást nyújt az ügyfeleknek, hogy nagy nyertessé váljanak.A cég tevékenysége minden bizonnyal az ügyfelek örömét jelenti a kínai új termék legkeresettebb vírusos DNS és Rna extrakciós készlete számára. Bővítettük üzletünket Németországban, Törökországban, Kanadában, az Egyesült Államokban, Indonéziában, Indiában, Nigériában, Brazíliában és a világ néhány más régiójában.Keményen dolgozunk azon, hogy a világ egyik legjobb beszállítója legyünk.
betartja a szerződést”, megfelel a piaci elvárásoknak, jó minőségével kiáll a piaci versenyből, valamint átfogóbb és kiválóbb támogatást nyújt az ügyfeleknek, hogy nagy nyertessé váljanak.A cég törekvése minden bizonnyal az ügyfelek örömeKínai Rna és DNS extrakciós készlet és nukleinsav extrakció, Örülünk, hogy kölcsönösen előnyös kapcsolatot alakítsunk ki Önnel a kiváló minőségű termékeink és megoldásaink, az elfogadható árak és a legjobb szolgáltatásunk alapján.Reméljük, hogy termékeink kellemes élményt és szépségérzetet nyújtanak Önnek.
Használati útmutatók:Plant Total RNA Isolation Kit Plus használati útmutató

betartja a szerződést”, megfelel a piaci elvárásoknak, jó minőségével kiáll a piaci versenyből, valamint átfogóbb és kiválóbb támogatást nyújt az ügyfeleknek, hogy nagy nyertessé váljanak.A cég tevékenysége minden bizonnyal az ügyfelek örömét jelenti a kínai új termék legkeresettebb vírusos DNS és Rna extrakciós készlete számára. Bővítettük üzletünket Németországban, Törökországban, Kanadában, az Egyesült Államokban, Indonéziában, Indiában, Nigériában, Brazíliában és a világ néhány más régiójában.Keményen dolgozunk azon, hogy a világ egyik legjobb beszállítója legyünk.
Kínai új termék Kínai Rna és DNS extrakciós készlet és nukleinsav extrakció. Várjuk, hogy kölcsönösen előnyös kapcsolatot alakítsunk ki Önnel kiváló minőségű termékeink és megoldásaink, elfogadható árak és legjobb szolgáltatásaink alapján.Reméljük, hogy termékeink kellemes élményt és szépségérzetet nyújtanak Önnek.

Az oszlop eltömődött

Az oszlop lezárása után az RNS-hozam csökken, vagy az RNS tisztítása lehetetlenné válik, és a kapott RNS tömege alacsony.

Gyakori okok elemzése:

1. A minta szünetek nem alaposak.

A mintatörés nem blokkolja teljesen a DNS-TISZTÍTÓ OSZLOPOT, miközben befolyásolja az RNS hozamát és minőségét.Javasoljuk a gyors őrlést elegendő folyékony nitrogénben, amikor a mintákat feltörte. Próbálja meg összetörni a minta sejtfalát, sejtmembránját és egyéb szöveteit.A poliol poliszacharidok növényi mintáihoz javasoljuk a Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS használatát.

2. Ha a leválasztott minta felülúszót DNS-tisztító oszloppal leszívja, a lehetséges sejtfragmentált csapadék belélegezhető.

A felvett sejtfragmentált üledékek a CSAK RNS-oszlopot okozzák, amely blokkolva lesz, amikor az RNS-adszorpciós műveletet végrehajtják (lásd a 6. lépést).Javasoljuk, hogy óvatosan szívja le ezt a felülúszót, hogy elkerülje a sejttörmelék felszívását.

3. A minta kezdeti mennyisége túl sok.

A túlzott mintahasználat a minta tökéletlen fragmentálódását vagy a PSL1 puffer általi nem teljes sejtlízist eredményezi, ami a tisztítóoszlop eltömődését eredményezi a tisztítás során.Plant Total RNS Isolation Kit Minden egyes tisztított műveleti minta 50 mg.A poliol poliszacharidok növényi mintáihoz javasoljuk, hogy próbálja ki a Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS-t.

4. A centrifuga hőmérséklete túl alacsony.

A teljes RNS izolálási és tisztítási folyamatot szobahőmérsékleten (20-25 °C) végezzük°C), kivéve, hogy a mintaszövetet folyékony nitrogén töri meg. Egyes kriogén centrifugák hőmérséklete 20 °C-nál alacsonyabb℃, ami a DNS-tisztító oszlop és/vagy a Csak RNS-oszlop blokkolását okozhatja.Ha ez megtörténik, állítsa a centrifuga hőmérsékletét 20-25 °C-ra℃, ésgyőződjön meg arról, hogy a líziskeveréket és/vagy az etanollal hozzáadott felülúszót előmelegítették 37 °C-ra°C.

Nem extrahált RNS, vagy az RNS-hozam alacsony

Általában sok tényező befolyásolja a visszanyerés hatékonyságát, mint például: minta RNS-tartalma, műveleti módszer, elúciós térfogat stb.

A gyakori okok elemzése az alábbiak szerint:

1.Jégfürdőt vagy alacsony hőmérsékletű (4°C) centrifugálást végeztünk a művelet során.

Javaslat: Szobahőmérsékleten (15-25°C) az egész folyamat során ne végezzen jeges fürdőt és alacsony hőmérsékletű centrifugálást.

2. Az RNS lebomlott a minta nem megfelelő tartósítása vagy a minta hosszú távú tartósítása miatt.

Javaslat: A frissen gyűjtött mintákat gyorsan le kell fagyasztani folyékony nitrogénben, majd hosszú ideig -80°C-on tárolni, kerülni kell a minták ismételt fagyasztását és felolvasztását;vagy azonnal áztassa a mintákat RNS-stabilizátor RNAlater oldatba (állati minták).

3. A minta elégtelen fragmentációja és lízise a tisztítóoszlop eltömődéséhez vezet.

Javaslat: A szövet őrlésekor ügyeljen arra, hogy a szövet megfelelően őrölve legyen, és gyorsan vigye át az előre elkészített PSL1 pufferbe (ellenőrizze, hogy a β-ME megfelelő arányban lett-e hozzáadva, lásd az eljárás 1. lépését).

4. Az eluenst helytelenül adtuk hozzá.

Javaslat: Ügyeljen arra, hogy az RNase-Free ddH2O-t a tisztítóoszlop membránjának közepébe csepegtesse.

5. Nem a megfelelő mennyiségű abszolút etanolt adták a PSL2 vagy PRW2 pufferhez.

Javaslat: Kérjük, kövesse az utasításokat, adjon megfelelő mennyiségű abszolút etanolt a PSL2 és a PRW2 pufferhez, és jól keverje össze a készlet használata előtt.

6. A szövetminta mennyisége nem megfelelő.

Javaslat: 50 mg szövetet használjon 500 μl PSL1 pufferhez.Túl sok szövet használata csökkenti a kivont RNS mennyiségét, és a kapott RNS tisztasága is csökken.Nyomatékosan javasoljuk, hogy a kezdeti mintaadag ne haladja meg az 50 mg-ot RNS extrakciós műveletenként.

7. Nem megfelelő elúciós térfogat vagy nem teljes elúció.

Javaslat: A tisztító oszlop eluens térfogata 50-200 μl;ha az elúciós hatás nem kielégítő, ajánlatos meghosszabbítani az időt szobahőmérsékleten az előmelegített RNase-Free ddH2O hozzáadása után, például 5-10 perccel.

8. PufferPRW2-vel történő mosás után a tisztító oszlop etanolmaradékot tartalmaz.

Javaslat: Ha az üres csövet 1 percig centrifugálják, és a PRW2 pufferben történő mosás után még maradt etanol, növelheti az üres cső centrifugálásának idejét 2 percre, vagy helyezze a tisztító oszlopot szobahőmérsékleten 5 percre, hogy teljesen eltávolítsa a maradék etanolt.

9. A készletet nem megfelelően használták.

Javaslat: A polifenolos poliszacharidok növényi mintáinál előfordulhat, hogy az olyan általános készletekkel, mint a Plant Total RNA Isolation Kit, nem lehet ideális RNS-mintákat nyerni.Javasoljuk a Plant Total RNA IsolationKit Plus használatát, amelyet kifejezetten polifenol poliszacharid növényi mintákhoz fejlesztettek ki.Kifejezetten polifenol és poliszacharid növényi mintákból RNS kinyerésére kifejlesztett készlet.

Az OD260/OD280 érték alacsony

Az RNS ddH2O-val történő eluálása és a spektrofotométer leolvasásához használt alacsony OD260/OD280 értékeket eredményez.Javasoljuk, hogy 10 mM Tris-HCl-t (pH 7,5) használjon (az RNS eluálására RNáz-mentes ddH2O helyett), hogy viszonylag helyes OD260/OD280 értékeket kapjunk, lásd „RNS-koncentrációs és tisztítási vizsgálatok” a 19. oldalon.

A tisztított RNS lebomlik

A tisztított RNS minősége olyan tényezőktől függ, mint a minta megőrzése, az RNáz szennyeződés és a manipuláció.

A gyakori okok elemzése:

1. A szövetmintákat a gyűjtés után nem tárolták időben.

Javaslat: Ha a szövetmintákat a begyűjtést követően nem használják fel időben, azonnal alacsony hőmérsékleten folyékony nitrogénben tárolják, vagy folyékony nitrogénben történő gyorsfagyasztás után helyezzék át -80°C-ra hosszú távú tárolásra, vagy azonnal merítsék a mintákat RNS-stabilizátor RNAlater oldatba (állati minták).Az RNS-kivonáshoz próbáljon meg frissen gyűjtött szövetmintákat használni.

2. A szövetminták ismételt fagyasztása és felengedése.

Javaslat: A szövetminták tárolása során konzerválás céljából célszerű kis darabokra vágni, felhasználáskor egy részét kiszedni, hogy elkerüljük a minták ismételt fagyasztása és felengedése miatti RNS lebomlását.

3.Az RNase-t bevezetik a műtőbe, vagy nem viselnek eldobható kesztyűt, maszkot stb.

Javaslat: Az RNS-kivonási kísérleteket legjobban külön RNS-műveletekben végezni, és a kísérlet előtt le kell tisztítani a laboratóriumi asztalt, és a kísérlet során eldobható kesztyűt és maszkot kell viselni, hogy az RNáz bejutása által okozott RNS degradációt a lehető legnagyobb mértékben elkerüljük.

4. A reagenst használat közben RNáz szennyezi.

Javaslat: Cserélje ki a növényi teljes RNS extrakciós készletek új sorozatára a kapcsolódó kísérletekhez.

5. Az RNS-manipulációhoz használt centrifugacsövek és pipettahegyek RNázzal szennyezettek.

Javaslat: Győződjön meg arról, hogy az RNS-kivonáshoz használt centrifugacsövek, pipettahegyek, pipetták stb. mind RNáz-mentesek.

Használati útmutatók:

Plant Total RNA Isolation Kit Plus használati útmutató