Haladásunk a magasan fejlett termékektől, a nagy tehetségektől és a többször megerősített technológiai erőktől függ a Factory Supply Techstar nukleinsav extrakciós és tisztító reagenseinek/Rna/DNS izolációs készletének köszönhetően, miközben a „folyamatos kiváló fejlesztés, vevői elégedettség” örök célját használjuk, biztosak vagyunk abban, hogy termékeink csúcsminősége stabil és az Önök legjobb hírnevű megoldásai külföldön.
Haladásunk a magasan fejlett termékektől, a nagy tehetségektől és a többször megerősített technológiai erőktől függKínai nukleinsav reagens és DNS/RNS extrakciós készlet, Annak érdekében, hogy megfeleljünk az otthoni és a fedélzeti ügyfelek növekvő igényeinek, továbbra is továbbvisszük a „Minőség, kreativitás, hatékonyság és hitel” vállalati szellemét, és arra törekszünk, hogy az aktuális trendet és a divatot éljük át.Szeretettel üdvözöljük cégünk látogatásában és együttműködésben.
Használati útmutatók:

 Haladásunk a magasan fejlett termékektől, a nagy tehetségektől és a többször megerősített technológiai erőktől függ a Factory Supply Techstar nukleinsav extrakciós és tisztító reagenseinek/Rna/DNS izolációs készletének köszönhetően, miközben a „folyamatos kiváló fejlesztés, vevői elégedettség” örök célját használjuk, biztosak vagyunk abban, hogy termékeink csúcsminősége stabil és az Önök legjobb hírnevű megoldásai külföldön.
Gyári ellátásKínai nukleinsav reagens és DNS/RNS extrakciós készlet, Annak érdekében, hogy megfeleljünk az otthoni és a fedélzeti ügyfelek növekvő igényeinek, továbbra is továbbvisszük a „Minőség, kreativitás, hatékonyság és hitel” vállalati szellemét, és arra törekszünk, hogy az aktuális trendet és a divatot éljük át.Szeretettel üdvözöljük cégünk látogatásában és együttműködésben.

Problémaelemzési útmutató

Az alábbi elemzés azokról a problémákról, amelyekkel találkozhatNövény összesenRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

A forgó oszlop eltömődött

A spin oszlop blokkolása az RNS-hozam csökkenését, vagy akár az RNS kinyeréséhez való tisztítását sem eredményezi, és a kapott RNS minősége alacsony lesz.

Gyakori okok elemzése:

1. A minta nem törött teljesen.

A nem teljes minta fragmentáció blokkolhatja a DNS-tisztító oszlopot, ami szintén befolyásolhatja az RNS hozamát és minőségét.Javasoljuk, hogy a mintadarabolás végrehajtásakor gyorsan őröljön be elegendő mennyiségű folyékony nitrogént, hogy a minták szövetei, például sejtfala és sejtmembránja a lehető legnagyobb mértékben megtörjön.A polifenol poliszacharidok növényi mintáihoz javasoljuk a Plant Total RNA Isolation Kit Plus használatát.

2. Szívja le a DNS-tisztító oszlopból izolált felülúszót, szívja le a lehetséges sejttörmelék-pelletet.

A leszívott sejttörmelék pellet eltömítheti a csak RNS-t tartalmazó oszlopot az RNS-adszorpciós eljárások során (lásd az eljárás 5. lépését, a poliszacharid polifenol eljárás 6. lépését).Javasoljuk, hogy ügyeljen a felülúszó leszívásakor, hogy elkerülje a sejttörmelékek leszívását.

3. A kezdeti mintamennyiség túl nagy.

A túlzott mintahasználat a minta tökéletlen fragmentálódását vagy a sejtek nem teljes lízisét eredményezi a PRL1 puffer vagy a PSL1 puffer által, ami a tisztítási műveletekhez eltömődött tisztítóoszlopot eredményez.A Plant Total RNA Isolation Kit kezdeti maximum 50 mg-ot tartalmaz egy kezelt minta egyszeri tisztítására.A polifenol-poliszacharidok növényi mintáihoz javasoljuk, hogy próbálja ki a Plant Total RNA Isolation Kit Plus-t.

4. A centrifuga hőmérséklete túl alacsony.

A teljes RNS izolálása és tisztítása, kivéve a mintaszövet folyékony nitrogénnel való szétszakítását, minden lépést szobahőmérsékleten (20-25 °C) végeznek.Egyes alacsony hőmérsékletű centrifugák hőmérséklete 20 °C alatt van, ami eltömődést okozhat a DNS-tisztító oszlopban és/vagy a csak RNS-t tartalmazó oszlopban.Ha ez megtörténik, állítsa a centrifuga hőmérsékletét 20-25 °C-ra, és melegítse elő a líziselegyet és/vagy az etanol elválasztó felülúszó hozzáadását 37 °C-ra.

Nem extrahált RNS, vagy az RNS-hozam alacsony

Általában sok tényező befolyásolja a visszanyerés hatékonyságát, mint például: minta RNS-tartalma, műveleti módszer, elúciós térfogat stb.

A gyakori okok elemzése az alábbiak szerint:

1.Jégfürdőt vagy alacsony hőmérsékletű (4°C) centrifugálást végeztünk a művelet során.

Javaslat: Működtesse szobahőmérsékleten (15-25°C) a teljes folyamat során, ne végezzen jeges fürdőt és alacsony hőmérsékletű centrifugálást.

       2.Az RNS lebomlott a minta nem megfelelő tartósítása vagy a minta hosszú távú tartósítása miatt.

Javaslat: A frissen gyűjtött mintákat gyorsan le kell fagyasztani folyékony nitrogénben, majd hosszú ideig -80°C-on tárolni, kerülni kell a minták ismételt fagyasztását és felolvasztását;vagy azonnal áztassa a mintákat RNS-stabilizátor RNAlater oldatba (állati minták).

       3.A minta elégtelen fragmentációja és lízise a tisztítóoszlop eltömődéséhez vezet.

Javaslat: A szövet őrlésekor ügyeljen arra, hogy a szövet megfelelően őrölve legyen, és gyorsan vigye át az előre elkészített PSL1 pufferbe (ellenőrizze, hogy a β-ME megfelelő arányban lett-e hozzáadva, lásd az eljárás 1. lépését).

4. Az eluenst helytelenül adtuk hozzá.

Javaslat: Győződjön meg arról, hogy az RNase-Free ddH₂O-t csepegtetünk a tisztítóoszlop membránjának közepébe.

5. Nem a megfelelő mennyiségű abszolút etanolt adták a PSL2 vagy PRW2 pufferhez.

Javaslat: Kérjük, kövesse az utasításokat, adjon megfelelő mennyiségű abszolút etanolt a PSL2 és a PRW2 pufferhez, és jól keverje össze a készlet használata előtt.

6. A szövetminta mennyisége nem megfelelő.

Javaslat: 50 mg szövetet használjon 500 μl PSL1 pufferhez.Túl sok szövet használata csökkenti a kivont RNS mennyiségét, és a kapott RNS tisztasága is csökken.Nyomatékosan javasoljuk, hogy a kezdeti mintaadag ne haladja meg az 50 mg-ot RNS extrakciós műveletenként.

7. Nem megfelelő elúciós térfogat vagy nem teljes elúció.

Javaslat: A tisztító oszlop eluens térfogata 50-200 μl;ha az elúciós hatás nem kielégítő, ajánlatos meghosszabbítani az időt szobahőmérsékleten az előmelegített RNase-Free ddH hozzáadása után₂O, például 5-10 perc.

8. A tisztítóoszlopon etanol-maradék van a PRW2 pufferrel történő mosás után.

   Javaslat: Ha az üres csövet 1 percig centrifugálják, és a PRW2 pufferben történő mosás után még maradt etanol, növelheti az üres cső centrifugálásának idejét 2 percre, vagy helyezze a tisztító oszlopot szobahőmérsékleten 5 percre, hogy teljesen eltávolítsa a maradék etanolt.

9. A készletet nem megfelelően használták.

   Javaslat: A polifenolos poliszacharidok növényi mintáinál előfordulhat, hogy az olyan általános készletekkel, mint a Plant Total RNA Isolation Kit, nem lehet ideális RNS-mintákat nyerni.Javasoljuk a Plant Total RNA IsolationKit Plus használatát, amelyet kifejezetten polifenol poliszacharid növényi mintákhoz fejlesztettek ki.Kifejezetten polifenol és poliszacharid növényi mintákból RNS kinyerésére kifejlesztett készlet.

Az OD260/OD280 érték alacsony

RNS-elúció ddH-val₂Az O és a spektrofotométer leolvasásához használt alacsony OD260/OD280 értékeket eredményez.Javasoljuk, hogy használjon 10 mM Tris-HCl-t, pH 7,5 (RNase-Free ddH helyett₂O az RNS eluálásához), hogy viszonylag helyes OD260/OD280 értékeket kapjunk, lásd „RNS-koncentrációs és tisztítási vizsgálatok” a 19. oldalon.

A tisztított RNS lebomlik

A tisztított RNS minősége olyan tényezőktől függ, mint a minta megőrzése, az RNáz szennyeződés és a manipuláció.

A gyakori okok elemzése:

1. A szövetmintákat a gyűjtés után nem tárolták időben.

    Javaslat: Ha a szövetmintákat a begyűjtést követően nem használják fel időben, azonnal alacsony hőmérsékleten folyékony nitrogénben tárolják, vagy folyékony nitrogénben történő gyorsfagyasztás után helyezzék át -80°C-ra hosszú távú tárolásra, vagy azonnal merítsék a mintákat RNS-stabilizátor RNAlater oldatba (állati minták).Az RNS-kivonáshoz próbáljon meg frissen gyűjtött szövetmintákat használni.

2. A szövetminták ismételt fagyasztása és felengedése.

   Javaslat: A szövetminták tárolása során konzerválás céljából célszerű kis darabokra vágni, felhasználáskor egy részét kiszedni, hogy elkerüljük a minták ismételt fagyasztása és felengedése miatti RNS lebomlását.

3.Az RNase-t bevezetik a műtőbe, vagy nem viselnek eldobható kesztyűt, maszkot stb.

   Javaslat: Az RNS-kivonási kísérleteket legjobban külön RNS-műveletekben végezni, és a kísérlet előtt le kell tisztítani a laboratóriumi asztalt, és a kísérlet során eldobható kesztyűt és maszkot kell viselni, hogy az RNáz bejutása által okozott RNS degradációt a lehető legnagyobb mértékben elkerüljük.

4. A reagenst használat közben RNáz szennyezi.

   Javaslat: Cserélje ki a növényi teljes RNS extrakciós készletek új sorozatára a kapcsolódó kísérletekhez.

5. Az RNS-manipulációhoz használt centrifugacsövek és pipettahegyek RNázzal szennyezettek.

Javaslat: Győződjön meg arról, hogy az RNS-kivonáshoz használt centrifugacsövek, pipettahegyek, pipetták stb. mind RNáz-mentesek.

Használati útmutatók:

Plant Total RNA Isolation Kit használati útmutató