Közvetlen RT-qPCR készlet
A készlet leírása:
◮ A Foregene által kifejlesztett Foreasy Reverse Transcriptase-t és Foreasy HS Taq DNS-polimerázt használó közvetlen RT-qPCR Kit egyedi reakciópufferrel erős ellenállást és kompatibilitást biztosít, és közvetlenül tesztelheti a reakciót a Foregene Lysis rendszer sablonként történő használatával.Ez a készlet alkalmazható COVID-19 nukleinsav-detektáló készlet és más patogén baktériumok nukleinsav-detektáló készletének fejlesztésére.
Leírás
A közvetlen RT-qPCR készlet külön csomagolt RT-qPCR puffert és nagy hatékonyságú enzimet biztosítkeverék (Taq、M-MLV、RI) ， kényelmessé teszi háttérkészletek és rendszerek létrehozásátbeállítás, egyszerű ellenőrzésen belül.
Műszaki adatok
500 tonna, 50 000 tonna
Kit összetevők
| A készlet tartalma (20 μL reakciórendszer) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Közvetlen enzimkeverék | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× közvetlen RT-qPCR puffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Utasítás | 1 | 1 |
Működési lépések
A reagens előkészítése előtt a készletben lévő összes reagenst szobahőmérsékleten fel kell olvasztani és óvatosan össze kell keverni.
A: Készít of sablon és reagens
1. Készítse elő az előkészített RNS-templátot (Az RNS-templát extrahálásához és tisztításához a Foregene Total RNA Isolation Kit sorozat készletét javasoljuk) vagy a minta krakkolási terméket (ajánlott a Foregene Lysis rendszer használata), specifikus primereket (10 μM) és egyéb releváns fogyóeszközöket, műszert.
2. Helyezze be a 2× Direct RT-qPCR puffert, RNase-Free ddH2O és 20× ROX referenciafestéket (ha van's szükséges) jéggel a dobozba, így ezek természetesen megolvadnak, és óvatosan keverjük össze.
B: Készít of RT-qPCR rendszer
asztal 1 : Készít of RT-qPCR srendszer
| Összetevő | Hangerő | Végső koncentráció |
| 2× közvetlen RT-qPCR puffer | 10 μL | 1× |
| Közvetlen enzimkeverék | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Fordított alapozó (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Szonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Sablon (RNS vagy lizátum) | X μL | |
| 20×ROX referenciafesték | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Teljes hangerő | 20μL |
C: Készlet a RT-qPCR reakció program
asztal 2 : RT-qPCR reaction program beállítás (számára példa: kettő-lépés módszer)
| Lépés | Hőfok | Idő | Ciklusok | Tartalom | |
| 1 | 50℃ | 15 perc | 1* | 1 | Fordított átírás |
| 2 | 95℃ | 1 perc | 1 | Elődenaturáció | |
| 3 | 95℃ | 10 mp | 40-45 | Denaturáció | |
| 60℃ | 30 mp 2* | Anneal/Extension | |||
Tárolás és eltarthatóság
-A készletet -20-on kell tárolni± 5℃.Az érvényességi idő 12 hónap.
- Kerülje az ismételt fagyasztási-olvadási ciklusokat (<5 ciklus).
