ForeDirect RT-qPCR készlet
A készlet leírása:
◮RNS közvetlen, valós idejű amplifikációhoz tampongyűjteményből, RNS tisztítási folyamatok nélkül.Ez a készlet egy órán belül befejezi a qRT-PCR ciklusokat.Az enzimkeverék a reverz transzkriptáz, a Hot-Start Taq DNS polimeráz és az RNáz inhibitor optimalizált keveréke.A Reaction Buffer tartalmazza az összes szükséges komponenst, beleértve az optimalizált pufferkomponenseket, a Mg2+, dUTP és dNTP.
Leírás
A ForeDirect RT-qPCR készletet az RNS közvetlen, valós idejű amplifikációjára tervezték tampongyűjteményből, RNS tisztítási folyamatok nélkül.Ez a készlet egy órán belül befejezi a qRT-PCR ciklusokat.Az enzimkeverék a reverz transzkriptáz, a Hot-Start Taq DNS polimeráz és az RNáz inhibitor optimalizált keveréke.A Reaction Buffer tartalmazza az összes szükséges komponenst, beleértve az optimalizált pufferkomponenseket, a Mg2+, dUTP és dNTP.
Műszaki adatok
100T
Kit összetevők
| Nukleinsav-leválasztó szer |
| RNS-védő |
| 2× RT-qPCR puffer |
| Enzimkeverék (Taq&M-MLV) |
| Utasítás |
PCR alkalmazás
1. Miután a PCR reakciócsöveket rövid ideig centrifugálta, helyezze őket az amplifikációs műszer mintatartójába.
2. Termikus protokoll
| Lépés | Hőfok | Idő | Ciklusok | |
| 1 | Fordított átírás | 50℃ | 15 perc | 1 |
| 2 | Elődenaturáció | 95℃ | 1 perc | 1 |
| 3 | Denaturáció | 95℃ | 10 másodperc | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60℃ | 30 másodperc | |
Jegyzet:A fluoreszcens jelet minden ciklus kiterjesztése után azonnal észleltük.
3. A beállítás után mentse el a fájlt és futtassa a reakcióprogramot.
Működési lépések
A reagens előkészítése előtt a készletben lévő összes reagenst szobahőmérsékleten fel kell olvasztani és óvatosan össze kell keverni.
Reagens előkészítése
1. Készítse elő a nukleinsav-kibocsátó keveréket
| Összetevő | Mennyiség mintánként vagy kontrollonként |
| Nukleinsav-leválasztó szer | 5μL |
| RNS-védő | 0,5 μl |
2. Készítse elő a reakciókeveréket
| Összetevő | Mennyiség mintánként vagy kontrollonként |
| 2× RT-qPCR puffer | 15 μL |
| Enzimkeverék (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Alapozók és szondák | 1 μL |
Tárolás és eltarthatóság
-A készletet -20-on kell tárolni± 5℃.Az érvényességi idő 12 hónap.
- Kerülje az ismételt fagyasztási-olvadási ciklusokat (<5 ciklus).
